【学术期刊】PAX1甲基化检测和HPVE6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用

【文献题目】：The application of PAX1 methylation detection and HPVE6/E7 mRNA detection in cervical cancer screening

【中文题目】：PAX1甲基化检测和HPVE6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用

【期刊杂志】：The Journal of Obstetrics and Gynaecology Research(IF: 1.73)

【文章链接】：https://obgyn.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/jog.14869

【研究目的】：探讨PAX1甲基化和人乳头瘤病毒(HPV) E6/E7 mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用，并与高危HR-HPV检测进行诊断效果比较。

【研究方法】：收集337例宫颈脱落细胞学标本（病例-对照研究），包括宫颈炎症70例，低级别鳞状上皮内病变（LSIL）72例，高级别鳞状上皮内病变（HSIL）97例，宫颈癌98例（鳞癌：78，腺癌：20，腺鳞癌：1）。验证PAX1基因甲基化检测（PAX1m）、HPV E6/E7 mRNA (E6/E7)、HR-HPV (HPV)检测的敏感性、特异性和准确性。

【研究结果】：HPV、HPV E6/E7、PAX1m检测的敏感性分别为89.23%、84.10%、86.67%，均保持较高水平。相比之下，HPV、E6/E7和PAX1检测的特异性仅为19.10%、37.32%和97.18%。PAX1的AUC(0.919)显著高于HPV(0.541)和E6/E7 (0.607)。

图1：HPV、E6E7、PAX1m诊断灵敏性、特异性

【研究结论】：E6/E7检测和PAX1检测的诊断效果优于HPV检测，尤其是PAX1检测。

【关键图表】

PAX1m在宫颈炎和LSIL病变中的阳性率低，但是在宫颈癌（78例鳞癌/19例腺癌/1例腺鳞癌）的阳性率为100%。PAX1在HISL的阳性率为73.2%，但26例PAX1阴性的HSIL患者，病理均未诊断为癌症，1年的随访，所有患者的HPV和TCT结果均为阴性。

图2：HPV、E6E7、PAX1m在不同程度宫颈病变的阳性率

PAX1m的准确度为91.1%，单独对HSIL+的敏感性为86.7%，联合HPV或E6/E7敏感性达97%以上。在敏感性相当的情况下，PAX1m具有97.2%的特异性。PAX1m的ROC曲线下面积（AUC）为0.92，说明PAX1m对宫颈病变HSIL+具有优异的诊断能力。

表1：临床性能分析表

检测	敏感性 %	特异性 %	准确度 %	AUC	约登指数
HPV	89.23	19.01	59.64	0.541	0.082
E6/E7	84.10	37.32	64.39	0.607	0.214
PAX1	86.67	97.18	91.10	0.919	0.839
HPV+PAX1	98.97	19.01	65.28	0.590	0.180
HPV+E6E7	90.77	18.31	60.24	0.545	0.091
E6/E7+PAX1	97.95	35.92	71.81	0.669	0.339

【讨论】

众所周知，持续的HR-HPV感染是宫颈癌和癌前病变的重要因素。研究发现年轻患者的HPV感染多为短暂性，女性较少出现症状，而老年患者更容易出现持续性HR-HPV感染，最终发展为HSIL+病变。

与此同时，研究表明在HPV相关的癌变过程中，细胞基因组会发生大量的表观遗传改变，而DNA甲基化是最常见的表观遗传改变之一。DNA通过甲基化调控基因表达，导致肿瘤抑制基因沉默和癌变。有研究表明，正常宫颈组织与宫颈病变组织PAX1的甲基化程度存在较大差异。PAX1基因在宫颈癌组织中的甲基化异常频率高达94.4%，PAX1甲基化在宫颈癌的进展中起着重要的作用，并保持着较高的敏感性和特异性。与传统HPV检测与TCT相比，PAX1甲基化检测具有更高的特异性。

本研究中，有26例PAX1阴性的HSIL患者，病理均未诊断为癌症。PAX1m阴性，可能是由于：

(1)一些病变在采样时更深入宫颈管，难以到达;或病灶靠近穹隆，不在颈孔内，不易取到；

(2)病变面积过小或病变本身不严重，难以发现。例如，11例患者经宫颈锥切或子宫切除术后，最终病理结果为慢性宫颈炎或低级鳞状上皮内病变(LSIL)，未发现HSIL及以上病变。

(3)可能是在检测过程中，细胞放置时间过长，剩余细胞少或其他原因，导致了错误的结果。通过对这26例患者1年的随访，所有患者的HPV和TCT结果均为阴性。说明PAX1m分子标记物，虽然在HISL中阳性率低，但相对安全可靠。

本研究中，LSIL组PAX1m阳性率明显低于HSIL+组(2.82% vs 86.67%)，宫颈癌组PAX1m

阳性率为100%。本研究进一步表明，随着宫颈病变严重程度的增加，PAX1甲基化检测的阳性率也随之升高，且PAX1基因甲基化可能促进宫颈癌的发生发展。

综上所述，HPV E6/E7 mRNA检测和PAX1基因甲基化检测的诊断效果优于HR-HPV检测，尤其是PAX1甲基化检测，其特异性高于HPV检测，且敏感性不降低，是一种高质量检测HSIL +的检测方法。